Rola stresu oksydacyjnego i nitracyjnego oraz szlaku katabolitów tryptofanu w patogenezie depresji

Abstract

Depresja jest najczęstszą chorobą psychiczną, dotykającą około 350 mln ludzi na całym Świecie. Dotychczasowe badania sugerują udział powiązanych ze sobą szlaków biochemicznych, tj.: stresu oksydacyjnego i nitracyjnego oraz nieprawidłowości szlaku katabolitów tryptofanu w rozwoju zaburzeń depresyjnych. Depresja związana jest z intensyfikacją procesów oksydacyjnych oraz niewydolnością systemów obrony antyoksydacyjnej. Co więcej, wykazano, że pacjenci z depresją cechują się obniżonym poziomem tryptofanu, a także zaburzeniami przemian tego egzogennego aminokwasu. W związku z tym celem niniejszej pracy było wyjaśnienie roli stresu oksydacyjnego i nitracyjnego oraz zaburzeń przebiegu szlaku katabolitów tryptofanu w molekularnym podłożu depresji. Materiał do badań stanowiły próbki genomowego DNA wyizolowane z krwi obwodowej pobranej od pacjentów ze zdiagnozowaną depresją i od osób z grupy kontrolnej, u których wykluczono obecność tej choroby oraz próbki genomowego DNA, RNA wyizolowane z krwi i struktur mózgowych oraz białka wyizolowanego ze struktur mózgowych szczurów poddanych procedurze chronicznego łagodnego stresu i terapii wenlafaksyną. Ludzki genomowy DNA wykorzystano do genotypowania polimorfizmów metodą łańcuchowej reakcji polimerazy z detekcją produktu specyficznego dla jednego allelu i/bądź drugiego allelu w czasie rzeczywistym Wyizolowane DNA, RNA oraz białko wykorzystano odpowiednio do analizy stopnia metylacji regionów promotorowych badanych genów, ekspresji na poziomie mRNA oraz białka. W tym celu zastosowano odpowiednio technikę łańcuchowej reakcji polimerazy z detekcją w czasie rzeczywistym (real-time PCR), analizy topnienia DNA o wysokiej rozdzielczości (MS-HRM, ang. methylation sensitive – high resolution melting) oraz Western Blot. Wyniki uzyskane w toku realizacji niniejszej pracy doktorskiej wskazują na udział stres oksydacyjnego i nitracyjnego, a także zaburzeń w przebiegu szlaku katabolitów tryptofanu w molekularnym mechanizmie rozwoju depresji.