Isolation and partial purification of a glutathione peroxidase from pig blood platelets

Abstract

Metodą Maddipati i Marnett (1987) wyizolowano i częściowo scharakteryzowano peroksydazę glutationową z płytek krwi świni. Proces oczyszczania przebiegał kolejno poprzez wysalanie siarczanem amonu, hydrofobową chromatografię na złożu Phenyl-Sepharose CL-4B oraz chromatografię jonowymienną. Elektroforeza w żelu poliakryloamidowym z SDS (w obecności /3-merkaptoetanolu) enzymu otrzymanego w ostatnim etapie oczyszczania ujawniła obecność podjednostki o masie cząsteczkowej 23 kDa. Wykazano, że w płytkach dominującą formą GSH-Px jest selenozależna peroksydaza glutationowa, ktora wykazuje ok. 86% całkowitej aktywności tego enzymu. Selenin sodowy powodował wzrost aktywności otrzymanego enzymu, podczas gdy jony miedzi, NEM i cisplatyna była inhibitorami peroksydazy glutationowej.